MATH-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419231

概要

Neurod6は、塩基性ヘリックス・ループ・ヘリックス（bHLH）型転写因子MATH-2をコードしており、発生期マウス神経系におけるニューロンの分化、成熟、生存を制御する主要な調節因子です。MATH-2は、神経突起伸長、軸索ガイダンス、グルタミン酸作動性ニューロンとしてのアイデンティティ維持を支える遺伝子プログラムに影響し、他のプロニューラルbHLH因子と協調して大脳皮質および海馬の回路形成を調整します。ニューロンの運命決定と結合性を転写レベルで制御することから、Neurod6は神経発生メカニズムや、認知・行動表現型に関与する経路の研究において重要です。bHLHによって駆動される分化ネットワークの破綻は、神経発達障害やニューロン脆弱性のモデルで一般的に検討されています。

MATH-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるNeurod6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Neurod6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Neurod6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MATH-2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MATH-2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Neurod6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MATH-2の機能に不可欠なNeurod6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Neurod6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MATH-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびMATH-2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Neurod6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MATH-2 HDRプラスミド（m）および MATH-2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNeurod6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNeurod6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。