Particules Lentivirales d'Activation (h) Maspin: sc-416693-LAC

Le gène humain **SERPINB5** code la **maspine**, un membre non inhibiteur de la famille des serpines, doté d’activités suppresseurs de tumeur dépendantes du contexte, qui influencent la différenciation épithéliale, l’adhérence cellulaire et la motilité. La maspine a été associée à la régulation du remodelage de la matrice extracellulaire et de la signalisation liée aux protéases, avec des effets rapportés sur la dynamique des adhérences focales et sur les réponses cellulaires au stress. Des altérations de l’expression de **SERPINB5** et de sa localisation subcellulaire ont été associées à la progression et au potentiel métastatique dans plusieurs carcinomes, ce qui en fait un marqueur utile pour étudier la plasticité épithélio-mésenchymateuse. Dans des modèles de cancers du sein, de la prostate et du pancréas, la modulation de la maspine a été utilisée pour explorer les voies qui régissent l’invasion, les programmes liés à l’angiogenèse et le contrôle transcriptionnel de l’état de lignée.

Les particules d'activation lentivirales Maspin (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de SERPINB5 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Maspin (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription SERPINB5, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Maspin. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif SERPINB5 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.