MARVELD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-413502

概要

MARVELD1（MARVEL domain containing 1）は、MALおよび小胞輸送や膜連結に関与する関連タンパク質に見られるMARVEL（MAL and related proteins for vesicle trafficking and membrane link）ドメインを含む小型の膜関連タンパク質をコードしており、膜マイクロドメインの組織化や膜貫通タンパク質の動態制御に関与する役割と整合的です。報告されている機能としては、MARVELD1が細胞接着、増殖、分化プログラムの制御に関与し、その下流で細胞周期チェックポイントやストレス応答性シグナル伝達に影響を及ぼすことが示されています。MARVELD1の発現変化は複数の腫瘍コンテキストで観察されており、浸潤や転移関連表現型、ならびに転写調節ネットワークとの関連で頻繁に研究されています。このため、MARVELD1は、膜の組織化が細胞の可塑性や腫瘍性形質に影響するシグナル伝達経路とどのように接続するかを検討するうえで有用な結節点となります。

MARVELD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMARVELD1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MARVELD1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MARVELD1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MARVELD1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MARVELD1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MARVELD1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MARVELD1の機能に不可欠なMARVELD1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MARVELD1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MARVELD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMARVELD1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MARVELD1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MARVELD1 HDRプラスミド（h）および MARVELD1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMARVELD1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMARVELD1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。