Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
MALT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-433761
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MALT1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MALT1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MALT1 Anticuerpo (D-1): sc-515389
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MALT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-433761 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Malt1 (MALT1) es una paracaspasa y una proteína de andamiaje esencial para la señalización inducida por receptores de antígeno en los linfocitos. Actúa dentro del complejo CARD11–BCL10–MALT1 (CBM) para acoplar la activación del receptor a la activación de las vías de NF-κB y MAPK. Mediante el corte proteasa-dependiente de múltiples reguladores de señalización y el andamiaje independiente de su actividad proteasa, MALT1 ayuda a ajustar los programas transcripcionales que controlan la activación de las células inmunitarias, la proliferación y la producción de citocinas. En modelos murinos, la alteración de la actividad de Malt1 perturba la homeostasis inmunitaria y se utiliza ampliamente para estudiar los mecanismos subyacentes a la inflamación, la diferenciación de linfocitos y la patología mediada por el sistema inmunitario. Su conectividad en las vías de señalización también convierte a Malt1 en un nodo clave para analizar el reconfiguramiento de redes de señalización en contextos hematopoyéticos y de células inmunitarias.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MALT1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Malt1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Malt1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Malt1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MALT1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Malt1 para la investigación de la señalización de MALT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Malt1 críticos para la función de MALT1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Malt1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MALT1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MALT1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Malt1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MALT1 (m) y el plásmido HDR MALT1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Malt1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Malt1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.