LTBP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402289

概要

LTBP1は、潜在型TGF-β複合体に結合し、その隔離（貯蔵）、活性化、および細胞への空間的提示を調節する細胞外マトリックス糖タンパク質である潜在型トランスフォーミング増殖因子β結合タンパク質1（LTBP-1）をコードします。TGF-βの生体内利用可能性（バイオアベイラビリティ）を制御することで、LTBP-1はSMAD依存性シグナル伝達や、マトリックスリモデリング、上皮間葉転換、細胞接着、組織恒常性に関わる下流プログラムに影響を与えます。LTBP1の機能は、フィブリリン微小線維の組織化および力学的制御を受けるTGF-β活性化と密接に関連しており、細胞外マトリックスの構築とサイトカインシグナル伝達を結び付けます。LTBP1/TGF-β軸の活性異常は、線維化に伴うリモデリング、がん関連の間質シグナル、ならびに血管・結合組織の病態生物学に関与するとされ、微小環境に駆動される表現型の機構研究において重要です。

LTBP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLTBP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LTBP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LTBP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LTBP-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LTBP-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LTBP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LTBP-1の機能に不可欠なLTBP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LTBP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LTBP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLTBP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LTBP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LTBP-1 HDRプラスミド（h）および LTBP-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLTBP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLTBP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。