LST1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421476

概要

Lst1は、白血球特異的トランスクリプト1（LST1）をコードしており、単球、マクロファージ、ミクログリアといった骨髄系細胞系列に多く発現する、小型の免疫調節性膜結合タンパク質です。LST1は、自然免疫細胞の活性化、遊走、細胞間コミュニケーションの形成に関与し、ITAM関連シグナル伝達ネットワーク、細胞骨格の再構築、炎症性の転写プログラムとの関連が報告されています。マウス組織では、Lst1の発現はマクロファージやミクログリアの状態と連動しており、免疫細胞浸潤や骨髄系活性化のマーカーとして一般的に用いられます。LST1に関連する骨髄系シグネチャーの変化は、炎症および神経炎症の状況や腫瘍免疫微小環境などで観察されており、免疫調節の機構研究や疾患に関連する骨髄系表現型の解明を支持します。

LST1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるLst1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Lst1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Lst1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LST1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LST1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Lst1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LST1の機能に不可欠なLst1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Lst1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LST1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびLST1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Lst1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LST1 HDRプラスミド（m）および LST1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLst1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLst1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。