Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LSP1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406808
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LSP1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico LSP1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LSP1 Antibody (TDP153): sc-53363
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LSP1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406808 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
La proteina 1 specifica dei linfociti (LSP1) è un regolatore citoscheletrico legante l’F-actina, arricchito nei leucociti e nelle cellule endoteliali, che coordina forma cellulare, motilità e adesione. Opera in reti di segnalazione a valle dei recettori immunitari e degli stimoli chemiocinici, influenzando il traffico integrina-dipendente, la migrazione transendoteliale e l’organizzazione spaziale del rimodellamento dell’actina nella corteccia cellulare. Attraverso questi ruoli, LSP1 contribuisce alle dinamiche di attivazione dei leucociti, al comportamento delle cellule presentanti l’antigene e alle interazioni con la barriera vascolare. Un’espressione o una funzione deregolate di LSP1 sono state associate ad alterazioni delle risposte infiammatorie e a fenotipi di migrazione delle cellule immunitarie rilevanti per l’immunopatologia e la biologia delle malattie ematologiche.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LSP1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene LSP1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del LSP1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto LSP1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LSP1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di LSP1 per lo studio della segnalazione di LSP1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni LSP1 critici per la funzione di LSP1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di LSP1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal LSP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal LSP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus LSP1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal LSP1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR LSP1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia LSP1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio LSP1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.