Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO LSP1 (h): sc-406808
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- LSP1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique LSP1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LSP1 Antibody (TDP153): sc-53363
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO LSP1 (h) | sc-406808 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
La protéine 1 spécifique des lymphocytes (LSP1) est un régulateur du cytosquelette se liant à la F-actine, enrichi dans les leucocytes et les cellules endothéliales, qui coordonne la forme cellulaire, la motilité et l’adhérence. Elle intervient dans des réseaux de signalisation en aval des récepteurs immunitaires et des signaux de chimiokines, influençant le trafic dépendant des intégrines, la migration transendothéliale et l’organisation spatiale du remodelage de l’actine au niveau du cortex cellulaire. Par ces fonctions, LSP1 contribue à la dynamique d’activation des leucocytes, au comportement des cellules présentatrices d’antigènes et aux interactions avec la barrière vasculaire. Une expression ou une fonction dérégulée de LSP1 a été associée à des réponses inflammatoires altérées et à des phénotypes de migration des cellules immunitaires, pertinents pour l’immunopathologie et la biologie des maladies hématologiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO LSP1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène LSP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du LSP1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert LSP1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine LSP1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en LSP1 pour l'étude de la signalisation de LSP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de LSP1 essentiels à la fonction de LSP1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de LSP1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le LSP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le LSP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus LSP1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le LSP1 plasmide HDR (h) et le LSP1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie LSP1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles LSP1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.