Plasmide Double Nickase (m) LSm11: sc-428300-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) LSm11 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LSm11 Double Nickase (m) et le plasmide LSm11 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Lsm11. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) LSm11 | sc-428300-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) LSm11 | sc-428300-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Lsm11** code **LSm11**, un composant essentiel de la petite ribonucléoprotéine nucléaire **U7 (snRNP)**, spécialisée dans la maturation de l’extrémité 3′ des pré-ARNm d’histones dépendants de la réplication. En participant à la voie de maturation des ARN d’histones dépendante de U7, LSm11 contribue à assurer une maturation correcte des transcrits d’histones, en couplant la progression de la phase S à l’assemblage de la chromatine et à la stabilité du génome. Une altération de la fonction de LSm11 devrait perturber l’homéostasie des ARNm d’histones, avec des effets en aval sur les réponses au stress de réplication de l’ADN et la régulation du cycle cellulaire. Ces processus sont largement pertinents pour les phénotypes prolifératifs et pour les études mécanistiques du maintien de la chromatine et de l’intégrité génomique dans des modèles cellulaires murins.
LSm11 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Lsm11 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Lsm11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Lsm11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Lsm11.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.