LRRC8D CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406426

개요

LRRC8D는 용적 조절 음이온 채널(VRAC)의 류신 반복(leucine-rich repeat)을 포함하는 서브유닛을 암호화하며, VRAC는 세포 팽윤에 의해 활성화되는 음이온 이동을 매개하고 세포 용적 항상성 유지에 기여하는 이형다중체(heteromeric) 복합체입니다. LRRC8D를 포함하는 VRAC 조립체는 오스몰라이트와 소형 음이온의 수송에 영향을 미치고, 산화환원 균형 및 세포 스트레스 반응을 조절할 수 있으며, 증식, 아폽토시스, 염증성 신호전달과 같은 과정들과도 교차합니다. 면역 및 장벽 조직에서는 LRRC8D를 포함한 VRAC의 구성(composition)이 활성산소종(ROS) 처리 조절 및 자극 의존적 신호 출력과 연관되어 있는 것으로 보고되었습니다. VRAC 활성의 이상 및 LRRC8 서브유닛 발현 패턴의 변화는 암 생물학, 대사 스트레스, 면역 매개 병태생리 등 다양한 맥락에서 연구되어 왔으며, 이러한 상황에서는 이온 수송과 산화 스트레스 경로가 흔히 재편됩니다.

LRRC8D CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 LRRC8D 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 LRRC8D 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 LRRC8D의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LRRC8D 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LRRC8D 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 LRRC8D 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LRRC8D 기능에 중요한 LRRC8D 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 LRRC8D 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LRRC8D CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 LRRC8D CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 LRRC8D 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LRRC8D HDR 플라스미드 (h) 및 LRRC8D HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 LRRC8D 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 LRRC8D 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.