LRRC26 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432708

概要

Lrrc26は、BKチャネル（大コンダクタンス型Ca2+・電位依存性カリウムチャネル）のゲーティングを調節するロイシンリッチリピート含有補助タンパク質LRRC26をコードします。LRRC26はBKチャネルの活性化をより生理的な膜電位域へシフトさせることで、膜興奮性、Ca2+シグナル伝達のダイナミクス、上皮におけるイオン輸送過程に影響を与えます。この調節作用により、LRRC26は平滑筋の緊張制御、分泌上皮の機能、刺激―分泌連関を制御する経路と関連づけられます。BKチャネルの制御異常や補助サブユニット発現の変化は、興奮性組織および上皮組織における生理機能障害と関連していることが報告されており、Lrrc26モデルはチャネル病や組織恒常性に関わる機序を解明するうえで有用です。

LRRC26 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるLrrc26遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Lrrc26内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Lrrc26のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LRRC26タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LRRC26シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Lrrc26欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LRRC26の機能に不可欠なLrrc26エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Lrrc26ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LRRC26 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびLRRC26 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Lrrc26遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LRRC26 HDRプラスミド（m）および LRRC26 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLrrc26ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLrrc26標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。