LRP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421464-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LRP1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LRP1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase LRP1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lrp1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LRP1 Anticorpo (8G1): sc-57353
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LRP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421464-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LRP1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421464-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína 1 relacionada ao receptor de lipoproteína de baixa densidade (LRP1), codificada pelo gene Lrp1 do camundongo, é um receptor endocítico e de sinalização multifuncional que coordena a captação de diversos ligantes, incluindo lipoproteínas, complexos protease–inibidor e componentes da matriz extracelular. Por meio de interações com proteínas adaptadoras e correceptores, a LRP1 influencia a endocitose mediada por clatrina, a remodelação do citoesqueleto e vias de transdução de sinal como PI3K–AKT e MAPK, moldando a migração e a sobrevivência celulares. O Lrp1 também modula a proteólise extracelular ao regular uPA/uPAR e a atividade de metaloproteinases de matriz, conectando o tráfego do receptor ao remodelamento tecidual. A desregulação da função de LRP1 tem sido associada a processos de neurobiologia, a fenótipos vasculares e metabólicos e a mecanismos do microambiente tumoral, tornando-a um alvo amplamente estudado em redes de depuração homeostática e sinalização celular.
LRP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lrp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lrp1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lrp1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lrp1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.