Plasmide Double Nickase (h) LONP1: sc-411273-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) LONP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide LONP1 Double Nickase (h) et le plasmide LONP1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LONP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: LONP1 Antibody (3B2): sc-293244
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) LONP1 | sc-411273-NIC | 20 µg | $410.00 |
LONP1 code une protéase ATP-dépendante de la matrice mitochondriale (LonP1) qui maintient la protéostasie en reconnaissant, dépliant et dégradant les protéines mal repliées ou endommagées par oxydation. Elle soutient le contrôle qualité mitochondrial, le maintien de l’ADNmt et la réponse mitochondriale aux protéines mal repliées, influençant ainsi l’efficacité de la phosphorylation oxydative, la gestion des ROS et la signalisation adaptative au stress. La fonction de LONP1 s’articule aussi avec la biogenèse mitochondriale et les processus liés à la mitophagie qui préservent l’intégrité de l’organite en cas de stress métabolique ou protéotoxique. Une activité dérégulée de LONP1 a été associée à des phénotypes de dysfonction mitochondriale et est étudiée dans des contextes de neurodégénérescence, de stress cardiométabolique et d’adaptation des cellules tumorales à une bioénergétique altérée.
LONP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LONP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LONP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LONP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LONP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.