LOC147645 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406583

概要

VSIG10L（LOC147645）は、Vセットおよび免疫グロブリンドメインを含むと予測されるタンパク質をコードしており、細胞表面に局在して細胞間相互作用や細胞‐細胞外基質（ECM）相互作用に関与すると考えられています。ドメイン構造や他の免疫グロブリンスーパーファミリー分子との相同性に基づき、VSIG10Lは上皮の接着プログラムや組織構築の制御に関与することが示唆されており、これらは分化、バリア機能、遊走に関わるシグナル伝達ネットワークと交差する過程です。関連するIgドメインタンパク質の発現変動は、腫瘍微小環境との相互作用の変化や転移形質と結び付けられることが多いため、VSIG10Lはがん生物学および上皮リモデリングにおける機序解明研究の候補標的となります。したがって、LOC147645の機能解析は、接着依存性シグナル伝達や細胞表現型の可塑性を制御する経路の理解に資する可能性があります。

LOC147645 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるVSIG10L遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、VSIG10L内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、VSIG10Lのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LOC147645タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LOC147645シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、VSIG10L欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LOC147645の機能に不可欠なVSIG10Lエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、VSIG10Lゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LOC147645 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLOC147645 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、VSIG10L遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LOC147645 HDRプラスミド（h）および LOC147645 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVSIG10Lホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVSIG10L標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。