LMTK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403191

概要

LMTK3（lemur tyrosine kinase 3）は、膜結合性のセリン／スレオニンキナーゼをコードしており、受容体のターンオーバーやシグナル持続時間に影響する細胞内シグナル伝達および小胞輸送経路の制御に関与するとされています。上皮系の文脈では、LMTK3はキナーゼ駆動性の転写プログラムの調節やホルモン受容体シグナルとのクロストークに関連づけられており、細胞増殖やストレス応答の形成に寄与します。LMTK3の発現や活性の変化は、がんに関連する複数の状況で報告されており、増殖因子への応答性、生存シグナル、治療に伴う抵抗性表現型への影響という観点から研究されています。そのため、LMTK3は、ヒトモデル系におけるキナーゼネットワークの配線、エンドメンブレン動態、ならびに下流の転写出力を解明するための有用な標的です。

LMTK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるLMTK3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、LMTK3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、LMTK3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LMTK3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LMTK3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、LMTK3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LMTK3の機能に不可欠なLMTK3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、LMTK3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LMTK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびLMTK3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、LMTK3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LMTK3 HDRプラスミド（h）および LMTK3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLMTK3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLMTK3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。