LMO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421447

概要

Lmo2は、LIM domain only 2（LMO2）をコードしており、LMO2は核内アダプタータンパク質として複数のタンパク質からなる転写複合体を組み立て、系譜の決定や分化を制御します。とくに造血系および内皮系の細胞区画で重要です。LMO2は、DNA結合性転写因子と補助因子を橋渡しすることで、幹／前駆細胞の維持、血管新生関連遺伝子の発現、赤血球系の発生に結びつくプログラムに影響を与えます。LMO2の発現異常や複合体組成の変化は、異常造血や腫瘍性の転写状態と関連しており、白血病発症機構や血管生物学の研究で頻繁に標的となっています。そのため、マウスのLmo2モデルは、転写ネットワークのアーキテクチャ、エンハンサー依存的な制御、発生における運命決定を解明する目的で広く用いられています。

LMO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるLmo2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Lmo2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Lmo2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、LMO2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、LMO2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Lmo2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• LMO2の機能に不可欠なLmo2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Lmo2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• LMO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびLMO2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Lmo2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  LMO2 HDRプラスミド（m）および LMO2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはLmo2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のLmo2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。