LHPP Lentiviral Activation Particles (m): sc-429326-LAC

Das murine Lhpp kodiert LHPP, eine histidin-spezifische Phosphatase mit Haloacid-Dehalogenase-ähnlicher Domäne, die die Protein-Histidinphosphorylierung reguliert – eine posttranslationale Modifikation, die an Signalübertragung, Zytoskelettdynamik und metabolischer Kontrolle beteiligt ist. Durch die Dephosphorylierung von Phosphohistidin-Substraten kann LHPP das Gleichgewicht zwischen Kinase- und Phosphataseaktivität sowie nachgeschaltete Signalwege beeinflussen, die Proliferation und zelluläre Stressantworten steuern. Veränderte LHPP-Aktivität wurde in der Literatur mit fehlregulierten Wachstumsprogrammen und metabolischer Umprogrammierung in krankheitsrelevanten Kontexten in Verbindung gebracht, was Lhpp zu einem nützlichen Genlokus für mechanistische Studien in Säugerzellen macht. Die Untersuchung der LHPP-Funktion unterstützt die Erforschung von Phospho-Signalnetzwerken, in denen Histidinphosphorylierung schwer zu messen und häufig unterrepräsentiert ist.

LHPP Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Lhpp-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

LHPP Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Lhpp-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen LHPP-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Lhpp-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.