LETM1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406163

개요

LETM1(류신 지퍼 EF-핸드 함유 막관통 단백질 1)은 미토콘드리아 내막에 존재하는 단백질로, 미토콘드리아 이온 항상성과 생물에너지 조절에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. LETM1은 미토콘드리아 형태, 크리스타(cristae) 조직화, 그리고 이온 수송을 산화적 인산화와 결합시키는 과정의 조절에 기여하며, 이를 통해 LETM1의 활성이 세포 에너지 대사 및 스트레스 반응과 연결됩니다. LETM1의 발현량(용량) 변화는 신경발달 관련 표현형 및 미토콘드리아 기능 이상과 연관되어 왔고, 조절 이상은 종양 세포의 대사와 증식 맥락에서도 연구되어 왔습니다. 미토콘드리아 조절자로서 LETM1은 세포사멸(apoptosis) 감수성, 활성산소종(ROS) 신호, 그리고 대사 경로 재편성에 미치는 영향 때문에 자주 연구됩니다.

LETM1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 LETM1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 LETM1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 LETM1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 LETM1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 LETM1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 LETM1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• LETM1 기능에 중요한 LETM1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 LETM1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• LETM1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 LETM1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 LETM1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  LETM1 HDR 플라스미드 (h) 및 LETM1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 LETM1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 LETM1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.