Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LAT Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421389-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LATO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LAT (m) e o Plasmídeo Double Nickase LAT (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lat. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LAT Anticorpo (11B.12): sc-53550
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LAT Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421389-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene murino **LAT** (*linker for activation of T cells*) codifica uma proteína adaptadora transmembranar que é rapidamente fosforilada após o engajamento do receptor de células T (TCR), criando sítios de ancoragem para proteínas de sinalização com domínio SH2. O LAT nucleia o *signalosome* de LAT para acoplar quinases proximais, como LCK e ZAP70, à ativação de PLCγ1, ao fluxo de cálcio, à sinalização Ras–MAPK e a vias dependentes de PI3K que controlam a ativação, a diferenciação e a produção de citocinas pelas células T. A interrupção da sinalização via LAT altera a formação da sinapse imune e a seleção de células T, e a disfunção da via de LAT está associada a desregulação imune e fenótipos linfoproliferativos em modelos experimentais. Como um hub central da sinalização imune adaptativa, o LAT é amplamente estudado em mecanismos de tolerância de células T, inflamação e na biologia de doenças mediadas pelo sistema imune.
LAT O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lat em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lat. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lat. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lat interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.