Plasmide Double Nickase (h) Laminin α-3: sc-401849-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Laminin α-3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Laminin α-3 Double Nickase (h) et le plasmide Laminin α-3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LAMA3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Laminin α-3 | sc-401849-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Laminin α-3 | sc-401849-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LAMA3 code la chaîne α3 de la laminine, un composant central de la laminine-332 des membranes basales, qui soutient l’adhérence épithéliale, la polarité et l’architecture tissulaire. La laminine α3 interagit avec des intégrines telles que α3β1 et α6β4 pour réguler l’assemblage des hémidesmosomes, la signalisation des adhésions focales et des voies en aval, notamment FAK/Src, PI3K–AKT et MAPK, qui coordonnent la migration et la survie cellulaires. Par son rôle dans l’organisation de la matrice extracellulaire et la communication cellule–matrice, LAMA3 influence la réépithélialisation des plaies, l’intégrité de la barrière et les programmes de différenciation épithéliale. Des altérations de la composition de la laminine-332 ou une dérégulation de LAMA3 sont étudiées dans des contextes associant des phénotypes de fragilité épidermique, une adhérence déficiente et l’invasion tumorale dans des cancers d’origine épithéliale.
Laminin α-3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LAMA3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LAMA3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LAMA3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LAMA3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.