Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) L-type Ca++ CP α1C: sc-401062-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) L-type Ca++ CP α1C correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide L-type Ca++ CP α1C Double Nickase (h) et le plasmide L-type Ca++ CP α1C Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CACNA1C. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: L-type Ca++ CP α1C Antibody (D-6): sc-398433
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) L-type Ca++ CP α1C | sc-401062-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) L-type Ca++ CP α1C | sc-401062-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1C code la sous-unité α1C formant le pore (CaV1.2) des canaux calciques de type L dépendants du voltage, qui assurent l’entrée de Ca2+ induite par la dépolarisation dans des cellules excitables et non excitables. L’entrée de calcium médiée par CaV1.2 couple l’activité membranaire à la signalisation intracellulaire, notamment le couplage excitation–contraction, l’intégration synaptique et la transcription dépendante du calcium via des voies telles que CaM/CaMK et calcineurine–NFAT. L’activité du canal influence l’électrophysiologie du muscle cardiaque et du muscle lisse ainsi que la plasticité neuronale, en modulant la dynamique des potentiels d’action et les programmes d’expression génique en aval. Des variations génétiques ou une dérégulation de CACNA1C sont associées à des phénotypes cardiovasculaires et à un risque accru de maladies neuropsychiatriques, ce qui en fait une cible largement étudiée au sein des réseaux de signalisation calcique.
L-type Ca++ CP α1C Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CACNA1C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CACNA1C. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CACNA1C. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CACNA1C.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.