L-Myc CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401836

概要

MYCLはL-Mycをコードしている。L-MycはMYCファミリーに属する塩基性ヘリックス–ループ–ヘリックス／ロイシンジッパー（bHLH-LZ）型転写因子で、MAXとヘテロ二量体を形成し、RNAポリメラーゼIIによって駆動される遺伝子発現を制御する。L-Mycは細胞周期の進行、リボソーム生合成、代謝リプログラミング、クロマチン関連の転写制御に影響し、増殖および分化プログラム全体にわたるシグナルを統合する。MYCLの活性はMYC/MAXネットワークのダイナミクスと交差し、細胞状況に応じてE2F依存性転写やアポトーシス性ストレス応答を調節し得る。MYCLの発現異常や増幅は、特定の腫瘍種における腫瘍性の転写プログラムと関連しており、系譜（リネージ）に関連した増殖制御や転写因子回路を研究する上で有用な結節点となる。

L-Myc CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMYCL遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MYCL内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MYCLのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、L-Mycタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、L-Mycシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MYCL欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• L-Mycの機能に不可欠なMYCLエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MYCLゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• L-Myc CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびL-Myc CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MYCL遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  L-Myc HDRプラスミド（h）および L-Myc HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMYCLホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMYCL標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。