KLRG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409220

概要

KLRG1（killer cell lectin-like receptor G1）は、ヒトのNK細胞およびエフェクター／メモリーT細胞の一部に発現する抑制性受容体であり、免疫監視における細胞傷害活性やサイトカイン産生の程度を調整する役割を担います。E-カドヘリンなどのカドヘリン分子に結合することで、KLRG1は抑制性シグナルを伝達し、活性化の閾値、細胞分化、免疫疲弊や老化（セネッセンス）に関連する特徴に影響を及ぼします。KLRG1は、終末分化したリンパ球集団の表現型解析マーカーとして、また慢性感染、炎症、腫瘍微小環境における抗原駆動性応答を追跡する指標として広く用いられています。そのため、KLRG1に関連する抑制トーンの破綻は、免疫抑制、組織常在性、ならびに抗ウイルス・抗腫瘍免疫を形作るチェックポイント様経路の研究において重要な検討対象となります。

KLRG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKLRG1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KLRG1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KLRG1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KLRG1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KLRG1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KLRG1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KLRG1の機能に不可欠なKLRG1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KLRG1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KLRG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKLRG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KLRG1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KLRG1 HDRプラスミド（h）および KLRG1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKLRG1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKLRG1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。