KLF6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400888

概要

KLF6は、GCリッチなプロモーター要素に結合して、細胞周期の進行、分化、組織リモデリングを制御する遺伝子プログラムを調節する亜鉛フィンガー型転写因子であるKrüppel-like factor 6をコードする。TGF-β/SMADなどの経路や、より広範なストレス応答性の転写ネットワークからのシグナルを統合し、増殖や細胞外マトリックス制御に関わる遺伝子の発現を調整する。KLF6の発現や機能の変化は、増殖制御の破綻や炎症・線維化プロセスの異常と関連づけられており、疾患文脈における転写制御の再配線を研究する上で重要である。ヒト細胞モデルでは、KLF6は、転写因子がプロモーター占有と下流の遺伝子発現を介して表現型変化をどのように協調的に制御するかを検討するための結節点として機能する。

KLF6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKLF6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KLF6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KLF6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KLF6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KLF6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KLF6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KLF6の機能に不可欠なKLF6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KLF6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KLF6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKLF6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KLF6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KLF6 HDRプラスミド（h）および KLF6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKLF6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKLF6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。