KLF6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400888

Descripción general

KLF6 codifica el factor tipo Krüppel 6, un factor de transcripción con dedos de zinc que se une a elementos promotores ricos en GC para regular programas génicos que controlan la progresión del ciclo celular, la diferenciación y la remodelación tisular. Integra señales de vías como TGF-β/SMAD y de redes transcripcionales más amplias sensibles al estrés para modular genes implicados en la proliferación y la regulación de la matriz extracelular. La expresión o función alteradas de KLF6 se han asociado con un control del crecimiento desregulado y con procesos inflamatorios o fibróticos, lo que lo hace relevante para estudiar la reconfiguración transcripcional en contextos de enfermedad. En modelos celulares humanos, KLF6 sirve como un nodo para explorar cómo los factores de transcripción coordinan cambios fenotípicos mediante la ocupación de promotores y la expresión génica aguas abajo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KLF6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KLF6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KLF6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KLF6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KLF6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KLF6 para la investigación de la señalización de KLF6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KLF6 críticos para la función de KLF6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KLF6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KLF6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KLF6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KLF6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KLF6 (h) y el plásmido HDR KLF6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KLF6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KLF6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.