KIR3DL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406227

概要

KIR3DL3 は、NK 細胞および T 細胞の一部サブセットに発現する抑制性のキラー細胞免疫グロブリン様受容体をコードしており、ITIM 依存的に SHP-1/2 などのホスファターゼを呼び寄せることで、細胞傷害活性やサイトカイン放出を抑制し、免疫監視に寄与します。活性化受容体の下流シグナルを調節することで、KIR3DL3 は免疫活性化と免疫寛容のバランスを微調整し、リンパ球のエフェクター機能や標的細胞認識を制御する経路に影響を与えます。KIR 遺伝子の内容や発現の多様性は、HLA 依存的な免疫相互作用の文脈でしばしば研究されており、腫瘍免疫、抗ウイルス応答、移植免疫生物学における示唆が得られています。抑制性受容体シグナルの異常は、慢性感染、自己免疫、がんに伴う免疫回避において免疫の基準点（セットポイント）を変化させ得るため、KIR3DL3 は自然免疫および自然免疫様リンパ球における抑制性チェックポイント様制御の機序研究に有用な標的です。

KIR3DL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKIR3DL3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KIR3DL3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KIR3DL3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KIR3DL3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KIR3DL3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KIR3DL3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KIR3DL3の機能に不可欠なKIR3DL3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KIR3DL3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KIR3DL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKIR3DL3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KIR3DL3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KIR3DL3 HDRプラスミド（h）および KIR3DL3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKIR3DL3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKIR3DL3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。