Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
KIF3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403463
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KIF3A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KIF3A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:KIF3A Anticorpo (E-5): sc-376680
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KIF3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403463 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KIF3A codifica uma subunidade motora da cinesina-2 que, em conjunto com KIF3B e KAP3, impulsiona o transporte anterógrado baseado em microtúbulos, necessário para a montagem do cílio primário e para o transporte intraflagelar. Por meio do seu papel na ciliogénese, KIF3A sustenta vias de transdução de sinal dependentes do cílio, incluindo Hedgehog e Wnt, influenciando a polaridade celular, a diferenciação e a homeostase dos tecidos. A disrupção da função de KIF3A está associada a fenótipos relacionados com cílios e tem sido estudada em contextos como anomalias do desenvolvimento e desregulação da sinalização. Em sistemas celulares humanos, a perda de KIF3A é frequentemente usada para investigar o tráfego ciliar, a localização de recetores e respostas transcricionais a jusante.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KIF3A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KIF3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KIF3A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KIF3A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KIF3A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KIF3A para a investigação da sinalização de KIF3A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KIF3A críticos para a função KIF3A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KIF3A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KIF3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KIF3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KIF3A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KIF3A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KIF3A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KIF3A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KIF3A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.