Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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KIF20A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403194
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- KIF20A El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico KIF20A, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: KIF20A Anticuerpo (D-3): sc-374508
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
KIF20A Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403194 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KIF20A (también conocida como MKlp2) codifica una proteína motora tipo quinesina que se asocia con los microtúbulos para coordinar la progresión mitótica, el ensamblaje del huso central y la citocinesis. Contribuye a la correcta segregación cromosómica y a la formación del cuerpo medio (midbody) mediante la regulación de la dinámica de los microtúbulos y de procesos vinculados al punto de control del huso. La actividad de KIF20A se relaciona con vías de control del ciclo celular que gobiernan la transición G2/M y la salida de la mitosis, y su desregulación se investiga con frecuencia en contextos de proliferación aberrante y aneuploidía en enfermedades humanas. Como motor asociado a la mitosis, KIF20A se utiliza ampliamente como un nodo funcional para estudiar la remodelación del citoesqueleto, el posicionamiento del plano de división y las dependencias de señalización proliferativa en modelos de biología del cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO KIF20A (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KIF20A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KIF20A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KIF20A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KIF20A.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KIF20A para la investigación de la señalización de KIF20A, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KIF20A críticos para la función de KIF20A
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KIF20A para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido KIF20A CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KIF20A CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KIF20A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KIF20A (h) y el plásmido HDR KIF20A (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KIF20A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KIF20A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.