KIAA1161 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412801

Descripción general

KIAA1161 codifica una proteína humana grande y poco caracterizada, que se predice que funciona en la regulación intracelular mediante interacciones proteína–proteína y la compartimentalización subcelular. Los patrones de expresión y anotación sugieren su participación en procesos celulares fundamentales como la organización del citoesqueleto, el tráfico de membranas y la integración de señales, con posibles efectos posteriores sobre la progresión del ciclo celular y programas transcripcionales sensibles al estrés. Dado que muchas proteínas de la familia KIAA actúan como nodos centrales en complejos de ARN/proteínas, la perturbación de KIAA1161 resulta útil para cartografiar la conectividad de vías y la señalización compensatoria. Se ha informado de una expresión alterada de proteínas KIAA no caracterizadas en múltiples contextos de enfermedad, lo que convierte a KIAA1161 en una diana relevante para estudios mecanísticos en biología del cáncer y otros fenotipos complejos, sin que ello implique utilidad clínica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO KIAA1161 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KIAA1161 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KIAA1161 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KIAA1161 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína KIAA1161.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KIAA1161 para la investigación de la señalización de KIAA1161, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de KIAA1161 críticos para la función de KIAA1161
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KIAA1161 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido KIAA1161 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido KIAA1161 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KIAA1161. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR KIAA1161 (h) y el plásmido HDR KIAA1161 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KIAA1161 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KIAA1161 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.