Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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KHS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405817
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KHS O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KHS, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:KHS Anticorpo (E-5): sc-374070
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KHS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405817 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A quinase quinase quinase quinase 5 ativada por mitógenos (MAP4K5), também conhecida como quinase homóloga a SPS1/STE20 (KHS), é uma quinase de serina/treonina da família Ste20 que atua a montante de módulos de sinalização de MAPK. A MAP4K5 contribui para a sinalização responsiva ao estresse e para a sinalização inflamatória por meio da regulação de JNK e de vias relacionadas, influenciando programas transcricionais que controlam a proliferação, a apoptose e a dinâmica do citoesqueleto. Em células humanas, a atividade de KHS tem sido associada à modulação de respostas imunes inatas e da sinalização metabólica, posicionando a MAP4K5 em redes mais amplas que integram sinais mediados por receptores com cascatas de quinases. A sinalização desregulada de MAP4K5 tem sido investigada em contextos como o redirecionamento de vias oncogênicas e mecanismos de doenças inflamatórias, sustentando seu uso como um nó para a dissecação de vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KHS (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAP4K5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAP4K5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAP4K5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KHS.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAP4K5 para a investigação da sinalização de KHS, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAP4K5 críticos para a função KHS
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAP4K5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KHS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KHS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAP4K5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KHS Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KHS (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAP4K5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAP4K5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.