KCNH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405756

概要

KCNH1 は、膜電位とカリウムイオン（K⁺）の流束を調節する電位依存性カリウムチャネル（Kv10.1/Eag1）をコードしており、細胞の興奮性や、その下流にあるカルシウム依存性シグナル伝達の形成に関与します。電気的特性にとどまらず、KCNH1 の活性は、生体電気（bioelectric）による制御機構やリン酸化依存的なチャネル調節を介して、細胞周期の進行、増殖、ならびに細胞骨格ダイナミクスにも影響を及ぼします。KCNH1 の発現は神経系および非神経系のさまざまな状況で報告されており、チャネル活性がニューロンの発火パターンや刺激依存的なシグナル伝達などの過程に結び付くことが示されています。KCNH1 の機能異常は神経発達に関連する表現型と関連し、がん生物学における異常な増殖シグナルの文脈でも研究されていることから、イオンチャネル駆動性経路の機構研究における標的としての有用性が支持されています。

KCNH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKCNH1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KCNH1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KCNH1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KCNH1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KCNH1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KCNH1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KCNH1の機能に不可欠なKCNH1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KCNH1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KCNH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKCNH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KCNH1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KCNH1 HDRプラスミド（h）および KCNH1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKCNH1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKCNH1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。