Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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karyopherin α3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410855
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- karyopherin α3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico karyopherin α3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: karyopherin α3 Anticuerpo (B-1): sc-514101
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
karyopherin α3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-410855 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
KPNA3 codifica la carioferina α3, un adaptador de la familia de las importinas-α que reconoce las señales clásicas de localización nuclear y se ensambla con la importina β para mediar el transporte nucleocitoplasmático dependiente de la GTPasa Ran a través del complejo del poro nuclear. Al regular la entrada al núcleo de factores de transcripción, mediadores de señalización y otras proteínas cargo, KPNA3 influye en programas de expresión génica, el control del ciclo celular, las respuestas al estrés y la señalización inmunitaria innata. Las alteraciones en la dinámica del transporte nuclear que involucran vías de importinas se han asociado con proliferación desregulada, señalización inflamatoria e interacciones huésped–patógeno en múltiples contextos de enfermedad. Por ello, KPNA3 es una diana útil para dilucidar cómo la importación selectiva de cargas moldea los fenotipos celulares y las redes de transducción de señales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO karyopherin α3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen KPNA3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del KPNA3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de KPNA3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína karyopherin α3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en KPNA3 para la investigación de la señalización de karyopherin α3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de KPNA3 críticos para la función de karyopherin α3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de KPNA3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido karyopherin α3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido karyopherin α3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus KPNA3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR karyopherin α3 (h) y el plásmido HDR karyopherin α3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología KPNA3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana KPNA3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.