KANSL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406711

概要

KANSL1は、NSL（nonspecific lethal）ヒストンアセチル基転移酵素複合体の中核構成要素をコードしており、KAT8/MOFと協調してヒストンH4（とりわけH4K16ac）をアセチル化し、クロマチンのアクセス性を制御します。このエピジェネティックな作用を通じて、KANSL1は細胞周期の進行、DNA損傷応答、神経発生に関連する遺伝子発現プログラムに影響を与えます。KANSL1の機能破綻はKoolen–de Vries症候群と強く関連し、より広範な神経発達表現型にも関与すると示唆されていることから、クロマチン介在性制御の作用機序研究において重要な標的となります。さらに、クロマチンリモデリングおよび転写制御との機能的つながりは、ヒストンアセチル化状態の変化が神経細胞分化や遺伝子ネットワークの安定性にどのような影響を及ぼすかを解明する研究を後押しします。

KANSL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKANSL1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KANSL1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KANSL1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KANSL1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KANSL1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KANSL1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KANSL1の機能に不可欠なKANSL1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KANSL1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KANSL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKANSL1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KANSL1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KANSL1 HDRプラスミド（h）および KANSL1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKANSL1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKANSL1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。