Plasmide Double Nickase (h) KA1: sc-403522-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KA1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KA1 Double Nickase (h) et le plasmide KA1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GRIK4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KA1 | sc-403522-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KA1 | sc-403522-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIK4 code la sous-unité KA1 du récepteur ionotrope au glutamate de type kaïnate, un composant de la neurotransmission excitatrice qui module la signalisation synaptique et l’excitabilité des réseaux neuronaux. KA1 contribue à l’assemblage du récepteur ainsi qu’à ses propriétés de gating au sein des synapses glutamatergiques, soutenant la plasticité dépendante de l’activité et le traitement de l’information au niveau des circuits. En couplant l’activité des récepteurs au glutamate à des cascades de signalisation perméables au calcium, GRIK4 influence des voies en aval impliquées dans le remodelage synaptique et la survie neuronale. Des études génétiques et d’expression ont associé la dérégulation de GRIK4/KA1 à des phénotypes neuropsychiatriques et neurodéveloppementaux, ce qui souligne sa pertinence pour la recherche mécanistique dans des modèles de maladies du système nerveux central.
KA1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GRIK4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GRIK4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GRIK4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GRIK4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.