Plásmido Doble Nickase (m) JAB1: sc-424107-NIC

Mouse **Cops5** codifica **JAB1 (CSN5)**, la subunidad metaloproteasa del **signalosoma COP9** que cataliza la **desnedilación de culinas** para regular la actividad de las **ligasas de ubiquitina E3 tipo cullina-RING** y la **proteostasis**. A través de esta función, JAB1 coordina la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y las salidas de la transducción de señales al controlar la degradación y la localización de proteínas reguladoras clave, incluidos moduladores de los programas transcripcionales de **AP-1**. JAB1 también se integra con vías que gobiernan la apoptosis, las respuestas al estrés y la señalización inflamatoria, vinculando la regulación dependiente de ubiquitina con el control transcripcional específico del contexto. La desregulación de la función de **CSN5/COP9** se ha asociado con proliferación aberrante y estados de señalización alterados en múltiples modelos relevantes para enfermedades, lo que convierte a **Cops5** en un objetivo frecuente para estudios mecanísticos del control de la vía ubiquitina–proteasoma.

JAB1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Cops5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Cops5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Cops5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Cops5 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.