IRX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404632

Visão geral

IRX3 (Iroquois homeobox 3) codifica um fator de transcrição do tipo homeobox que ajuda a estabelecer programas transcricionais durante o padrão embrionário e a organogênese, com funções dependentes do contexto na especificação do destino celular e na diferenciação. Em células humanas, o IRX3 integra-se a redes de sinalização do desenvolvimento, incluindo vias ligadas à sinalização Wnt e BMP, para moldar decisões de linhagem e a expressão gênica específica de tecidos. Para além do desenvolvimento, alterações na regulação de IRX3 têm sido associadas a fenótipos metabólicos e a mudanças na biologia de adipócitos, e a expressão desregulada de IRX3 foi relatada em múltiplos contextos de câncer. Essas características tornam o IRX3 um nó útil para estudar controle transcricional, estado de diferenciação e circuitos regulatórios gênicos conduzidos por vias de sinalização.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IRX3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IRX3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IRX3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IRX3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IRX3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IRX3 para a investigação da sinalização de IRX3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IRX3 críticos para a função IRX3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IRX3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo IRX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IRX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IRX3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo IRX3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IRX3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IRX3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IRX3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.