Plásmido Doble Nickase (h) IRP-2: sc-401710-NIC

El gen humano **IREB2** codifica la proteína reguladora del hierro 2 (**IRP-2**), un factor citosólico de unión a ARN que controla el metabolismo del hierro a nivel postranscripcional al reconocer elementos de respuesta al hierro en los ARNm diana. IRP-2 modula la estabilidad y la traducción de transcritos clave del manejo del hierro, incluidos el receptor de transferrina (**TFRC**) y las subunidades de ferritina (**FTH1/FTL**), coordinando así la captación, el almacenamiento y la utilización del hierro. Su actividad está estrechamente acoplada a la disponibilidad celular de hierro y al estado redox, y se entrecruza con la función mitocondrial, la biosíntesis de hemo y las vías de estrés oxidativo. La desregulación de la señalización **IREB2/IRP-2** se ha implicado en la dishomeostasis del hierro observada en la neurodegeneración, en fenotipos relacionados con la anemia y en respuestas al estrés relevantes para la ferroptosis, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la homeostasis de metales.

IRP-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IREB2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IREB2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IREB2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IREB2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.