Plásmido CRISPR de Activación (h) IRF-2: sc-402135-ACT
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmdo de Activación CRISPR (h) IRF-2 es un sistema de activación de la trascripción mediante una activación sinérgica (SAM), diseñado para incrementar la expresión de un gen concreto
- Los Plásmdo de Activación CRISPR (h) IRF-2 incluyen los siguientes tres plásmidos, con un radio 1:1:1 : plásmido codificador de la nucleasa Cas 9 desactivada (dCas9), (D10A y N863A) fusionadas al dominio de transactivación VP64 y el gen de resistencia a blasticidina; plásmido codificador de la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 y el gen de resistencia a Higromicina; plásmido codificador de la secuencia diana específica de 20 nt de ARN y el gen de resistencia a puromicina.
- El complejo SAM resultante se une en un punto específico a unos 200 -250 nt aguas arriba del inicio de la transcripción del gen diana y ofrece un potente punto de reclutamiento de factores de transcripción para un eficiente incremento de la activación genica.
- Los gRNA codificados por el plásmido de activación CRISPR IRF-2 (h) y el plásmido de activación CRISPR IRF-2 (h2) se dirigen a regiones reguladoras distintas situadas aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción de IRF2. Puede que haya uno o ambos diseños disponibles
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IRF-2 Anticuerpo (G-10): sc-374327
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido CRISPR de Activación (h) IRF-2 | sc-402135-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Plásmido CRISPR de Activación (h2) IRF-2 | sc-402135-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
El factor regulador de interferón 2 (IRF2) codifica IRF-2, un factor de transcripción de unión al ADN que modula la señalización del interferón de tipo I y programas génicos más amplios de la inmunidad innata. IRF-2 compite con miembros relacionados de la familia IRF en elementos de respuesta estimulados por interferón para ajustar la transcripción impulsada por citocinas, configurando las respuestas antivirales, el tono inflamatorio y las decisiones sobre el estado celular. A través de estas actividades, IRF-2 influye en vías que controlan la presentación de antígenos, la apoptosis y redes transcripcionales vinculadas al ciclo celular. La expresión o actividad desregulada de IRF2 se ha asociado con disfunción inmunitaria y fenotipos transcripcionales relevantes para el cáncer, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en estudios de inmunología y señalización oncogénica.
IRF-2 El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de IRF2 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.
IRF-2 El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus IRF2 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.
Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional IRF2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de IRF-2. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo IRF2 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de IRF-2 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía IRF-2 en células tumorales con expresión de IRF2 silenciada o reducida.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.