IP3R-I Lentiviral Activation Particles (h): sc-400986-LAC

ITPR1 kodiert den Inositol-1,4,5-trisphosphat-Rezeptor Typ 1 (IP3R-I), einen Ca²⁺-Freisetzungskanal des endoplasmatischen Retikulums, der IP3-Signale in zytosolische Calciumtransienten übersetzt. IP3R-I verknüpft GPCR/PLC-Signalwege mit calciumabhängigen Prozessen wie Neurotransmission, synaptischer Plastizität, Sekretion und transkriptioneller Regulation über Signalachsen wie CaMK, Calcineurin–NFAT und CREB. Durch die Formung der intrazellulären Ca²⁺-Dynamik und der ER–Mitochondrien-Kopplung beeinflusst IP3R-I Stoffwechsel, Zellüberleben und Stressantworten. Eine veränderte Aktivität oder Expression von ITPR1 wurde mit neurologischen Phänotypen in Verbindung gebracht, darunter spinocerebelläre Ataxien und weitere Erkrankungen, die mit einer gestörten Calciumhomöostase zusammenhängen.

IP3R-I Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ITPR1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IP3R-I Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ITPR1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IP3R-I-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ITPR1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.