IP Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404135

概要

PTGIR は、プロスタサイクリン（PGI2）に結合して cAMP シグナル伝達および下流の PKA 依存的な転写プログラムを制御する、G タンパク質共役型受容体であるヒトのプロスタサイクリン（IP）受容体をコードしています。IP 受容体の活性化は、血管トーヌス、血小板応答性、平滑筋細胞の挙動を調節し、エイコサノイド生合成と GPCR のセカンドメッセンジャー経路を統合します。さらに PTGIR シグナルは、サイトカイン産生やバリア機能の制御を通じて、炎症性回路や内皮の恒常性とも連携します。プロスタサイクリン–IP 受容体系の活性変化は、心肺系および血管機能障害に関わる表現型と関連づけられており、血栓症、肺血管生物学、炎症性疾患の機序研究における重要性を支持しています。

IP Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるPTGIR遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、PTGIR内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、PTGIRのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IP Receptorタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IP Receptorシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、PTGIR欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IP Receptorの機能に不可欠なPTGIRエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、PTGIRゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IP Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIP Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、PTGIR遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IP Receptor HDRプラスミド（h）および IP Receptor HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPTGIRホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPTGIR標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。