Partículas Lentivirales de Activación (m) Integrin αX/ITGAX/CD11c: sc-421170-LAC

Itgax codifica la integrina αX (CD11c), que se heterodimeriza con la integrina β2 (CD18) para formar el receptor del complemento 4 (CR4), un receptor clave de adhesión y fagocitosis en linajes mieloides, incluidas las células dendríticas, los macrófagos y subpoblaciones de monocitos. CD11c participa en la adhesión y migración de leucocitos, así como en la formación de la sinapsis inmunológica, mediante interacciones con ligandos como iC3b y las ICAM, conectando señales extracelulares con la remodelación del citoesqueleto y vías de señalización posteriores que determinan la captación y presentación de antígenos. En inmunología de ratón, ITGAX se utiliza ampliamente como marcador y regulador funcional de la diferenciación de las células dendríticas y su tráfico tisular, con relevancia para las respuestas inflamatorias y la desregulación inmunitaria en modelos de autoinmunidad, infección e inmunología tumoral. Alterar la expresión de Itgax ayuda a investigar los estados de activación de las células mieloides, la función de las células presentadoras de antígeno y los mecanismos de eliminación dependientes del complemento, tanto in vivo como in vitro.

Las partículas de activación lentiviral Integrin αX/ITGAX/CD11c (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Itgax en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Integrin αX/ITGAX/CD11c (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Itgax, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Integrin αX/ITGAX/CD11c. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Itgax y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.