Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421165

Übersicht

Itga7 kodiert Integrin α7 (ITGA7), eine α‑Untereinheit, die mit Integrin β1 zu einem lamininbindenden Rezeptor heterodimerisiert, der besonders in Skelett- und Herzmuskel angereichert ist. Dieser Adhäsionsrezeptor koppelt die extrazelluläre Matrix an das Aktinzytoskelett und trägt zur Adhäsion, Migration und Differenzierung von Myoblasten bei, während er die Signalübertragung über fokale Adhäsionskomplexe formt, die FAK/Src, ILK sowie die nachgeschalteten PI3K–AKT- und MAPK-Signalwege einbinden. Die ITGA7‑abhängige Mechanotransduktion unterstützt die Stabilität von Muskelfasern und die Organisation der neuromuskulären Endplatte, indem sie extrazelluläre Laminin-Signale mit intrazellulärem Zytoskelett‑Remodeling verknüpft. Eine veränderte ITGA7‑Funktion oder -Expression ist in Modellsystemen mit beeinträchtigter Muskelintegrität und dystrophieähnlichen Phänotypen assoziiert und macht ITGA7 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung von Muskelentwicklung, Regeneration und Signalgebung der extrazellulären Matrix.

Das Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Itga7-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Itga7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Itga7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Integrin α7/ITGA7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Itga7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Integrin α7/ITGA7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Itga7-Exone abzielen, die für die Integrin α7/ITGA7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Itga7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Itga7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Integrin α7/ITGA7 HDR-Plasmid (m) und Integrin α7/ITGA7 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Itga7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Itga7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.