Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421165

概要

Itga7はインテグリンα7（ITGA7）をコードしており、インテグリンβ1とヘテロ二量体を形成してラミニン結合性受容体となるαサブユニットです。この受容体は骨格筋および心筋で高発現しています。この接着受容体は細胞外マトリックスをアクチン細胞骨格へ連結し、筋芽細胞の接着・遊走・分化に寄与するとともに、FAK/SrcやILKが関与するフォーカルアドヒージョン複合体を介して、下流のPI3K–AKT経路およびMAPK経路を含むシグナル伝達を調節します。ITGA7依存的なメカノトランスダクションは筋線維の安定性や神経筋接合部の組織化を支え、細胞外のラミニンからの刺激を細胞内の細胞骨格リモデリングへと結び付けます。ITGA7の機能や発現の変化は、モデル系において筋組織の恒常性低下やジストロフィー様表現型と関連しており、筋発生・再生および細胞外マトリックスシグナル伝達の研究に有用な標的（ノード）となります。

Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるItga7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Itga7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Itga7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Integrin α7/ITGA7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Integrin α7/ITGA7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Itga7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Integrin α7/ITGA7の機能に不可欠なItga7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Itga7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Integrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIntegrin α7/ITGA7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Itga7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Integrin α7/ITGA7 HDRプラスミド（m）および Integrin α7/ITGA7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはItga7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のItga7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。