Integrin β5/ITGB5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421177
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Integrin β5/ITGB5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Integrin β5/ITGB5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Integrin β5/ITGB5 Anticorpo (F-5): sc-398214
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Integrin β5/ITGB5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421177 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Itgb5 codifica a integrina β5, um recetor transmembranar de adesão que se associa principalmente à integrina αV para formar αVβ5, permitindo a adesão celular a ligandos da matriz extracelular, como a vitronectina. Por meio da montagem de adesões focais e de sinalização bidirecional, a αVβ5 modula a remodelação do citoesqueleto e ativa vias como FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK/ERK, que coordenam migração, sobrevivência e proliferação. A ITGB5 também contribui para processos de endocitose e de mecanotransdução que influenciam a remodelação tecidual, respostas angiogénicas e dinâmicas epitélio–mesenquimais. A desregulação da sinalização por integrinas e programas de adesão dependentes de β5 alterados têm sido implicados em modelos de fibrose, progressão tumoral e remodelação do microambiente inflamatório, apoiando a sua utilidade em estudos mecanísticos de fenótipos conduzidos pela adesão.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Integrin β5/ITGB5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Itgb5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Itgb5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Itgb5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Integrin β5/ITGB5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Itgb5 para a investigação da sinalização de Integrin β5/ITGB5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Itgb5 críticos para a função Integrin β5/ITGB5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Itgb5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Integrin β5/ITGB5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Integrin β5/ITGB5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Itgb5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Integrin β5/ITGB5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Integrin β5/ITGB5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Itgb5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Itgb5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.