Integrin α4/ITGA4/CD49d Lentiviral Activation Particles (h): sc-401336-LAC

ITGA4 kodiert Integrin α4 (CD49d), eine α‑Untereinheit, die mit β1 (VLA‑4) oder β7 heterodimerisiert und so Adhäsionsrezeptoren bildet, die für die Leukozytenmigration und das „Homing“ in Gewebe von zentraler Bedeutung sind. Durch die Bindung an Liganden wie VCAM1 und Fibronectin koordiniert Integrin α4 Zell‑Zell‑ und Zell‑Matrix‑Interaktionen, die feste Adhäsion, transendotheliale Migration und die Organisation der immunologischen Synapse regulieren. Die ITGA4‑Signalgebung greift in die Dynamik fokaler Adhäsionen ein und in nachgeschaltete Kinasen einschließlich FAK/Src sowie die PI3K‑AKT‑ und MAPK‑Signalwege und prägt dadurch Zytoskelett‑Remodellierung und Überlebenssignale in motilen Zellen. Eine fehlregulierte α4‑Integrin‑Aktivität wurde mit der Rekrutierung entzündlicher Zellen und immunvermittelter Pathologie in Verbindung gebracht; zudem wird sie breit in hämatopoetischen Malignomen und metastatischen Prozessen untersucht, bei denen Adhäsion und Nischeninteraktionen die Krankheitsbiologie beeinflussen.

Integrin α4/ITGA4/CD49d Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ITGA4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Integrin α4/ITGA4/CD49d Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ITGA4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Integrin α4/ITGA4/CD49d-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ITGA4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.