Integrin α1/ITGA1/CD49a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401275

Visão geral

ITGA1 codifica a integrina α1 (CD49a), que forma um heterodímero com a integrina β1 para constituir um recetor de ligação ao colagénio e à laminina, mediando a adesão célula–matriz extracelular e a mecanotransdução. Por meio da montagem de adesões focais e da sinalização via FAK/Src, PI3K–AKT e vias MAPK, a integrina α1 influencia a organização do citoesqueleto, a migração, a proliferação e a sobrevivência de forma dependente do contexto. A atividade de ITGA1 contribui para a regulação da remodelação tecidular e do posicionamento de células inflamatórias, ao modular a dinâmica de adesão e as respostas transcricionais a jusante. Alterações na sinalização da integrina α1/β1 têm sido associadas a interações célula–matriz desreguladas observadas na fibrose, na comunicação cruzada tumor–estroma e na remodelação do microambiente imunitário, tornando-a um alvo útil para estudos focados em vias de sinalização.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Integrin α1/ITGA1/CD49a (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ITGA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ITGA1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ITGA1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Integrin α1/ITGA1/CD49a.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ITGA1 para a investigação da sinalização de Integrin α1/ITGA1/CD49a, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ITGA1 críticos para a função Integrin α1/ITGA1/CD49a
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ITGA1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Integrin α1/ITGA1/CD49a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Integrin α1/ITGA1/CD49a Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ITGA1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Integrin α1/ITGA1/CD49a Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Integrin α1/ITGA1/CD49a (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ITGA1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ITGA1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.