Plasmide Double Nickase (h) IL-8RA: sc-401645-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-8RA correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-8RA Double Nickase (h) et le plasmide IL-8RA Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CXCR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-8RA Antibody (B-1): sc-7303
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-8RA | sc-401645-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-8RA | sc-401645-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXCR1 code pour le récepteur alpha de l’interleukine‑8 (IL‑8RA), un RCPG à sept domaines transmembranaires qui se lie aux chimiokines CXC ELR+ telles que CXCL8/IL‑8 afin de coordonner la chimiotaxie des neutrophiles, leur adhésion, la dégranulation et l’explosion oxydative. Après engagement du ligand, IL‑8RA se couple aux protéines G pour activer les voies PLCβ/flux de Ca²⁺, PI3K–AKT, MAPK/ERK et des petites GTPases, modulant le remodelage du cytosquelette et la migration dirigée. L’activité de CXCR1 s’intègre à la surveillance de l’immunité innée et aux réseaux de cytokines inflammatoires, influençant le trafic des leucocytes au sein des tissus infectés ou lésés. Une signalisation dérégulée de CXCR1 a été associée à des affections inflammatoires chroniques et à l’inflammation associée aux tumeurs, via ses effets sur le recrutement des cellules myéloïdes et sur les microenvironnements inflammatoires.
IL-8RA Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CXCR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CXCR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CXCR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CXCR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.