IL-4I1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420354

概要

Il4i1は、インターロイキン4誘導遺伝子1（IL-4I1）をコードしており、IL-4I1は抗原提示細胞に発現し、炎症性および腫瘍様の微小環境で誘導される、分泌型のL-アミノ酸オキシダーゼです。IL-4I1はフェニルアラニンなどのアミノ酸の酸化的脱アミノ化を触媒し、過酸化水素を含む代謝産物を生成することで、細胞のレドックスバランスや免疫シグナル伝達に影響を与え得ます。アミノ酸代謝および酸化ストレス経路を介して、IL-4I1は骨髄系細胞のプログラム、T細胞の活性化閾値、そしてより広範な免疫調節ネットワークに影響します。IL-4I1活性の破綻は、免疫抑制の変化、慢性炎症、がんに関連した免疫回避と関連することが報告されており、マウス系で免疫代謝の機構解析を行ううえで有用な研究対象（ノード）となります。

IL-4I1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl4i1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il4i1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il4i1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-4I1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-4I1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il4i1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-4I1の機能に不可欠なIl4i1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il4i1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-4I1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-4I1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il4i1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-4I1 HDRプラスミド（m）および IL-4I1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl4i1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl4i1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。