IL-4I1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420354

Descripción general

Il4i1 codifica el gen 1 inducido por interleucina 4 (IL-4I1), una L-aminoácido oxidasa secretada expresada por células presentadoras de antígeno e inducible en microambientes inflamatorios y de tipo tumoral. IL-4I1 cataliza la desaminación oxidativa de aminoácidos como la fenilalanina, generando productos metabólicos, entre ellos peróxido de hidrógeno, que pueden modular el equilibrio redox y la señalización inmunitaria. A través del metabolismo de aminoácidos y de vías de estrés oxidativo, IL-4I1 influye en los programas de las células mieloides, en los umbrales de activación de las células T y en circuitos inmunorreguladores más amplios. La actividad desregulada de IL-4I1 se ha relacionado en la literatura con cambios en la inmunosupresión, inflamación crónica y evasión inmunitaria asociada al cáncer, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de inmunometabolismo en sistemas murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-4I1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Il4i1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Il4i1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Il4i1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-4I1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Il4i1 para la investigación de la señalización de IL-4I1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Il4i1 críticos para la función de IL-4I1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Il4i1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IL-4I1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IL-4I1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Il4i1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-4I1 (m) y el plásmido HDR IL-4I1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Il4i1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Il4i1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.