Plasmide Double Nickase (h) IL-3/IL-5/GM-CSFRβ: sc-401045-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-3/IL-5/GM-CSFRβ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-3/IL-5/GM-CSFRβ Double Nickase (h) et le plasmide IL-3/IL-5/GM-CSFRβ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CSF2RB. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-3/IL-5/GM-CSFRβ Antibody (1C1): sc-21765
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-3/IL-5/GM-CSFRβ | sc-401045-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-3/IL-5/GM-CSFRβ | sc-401045-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSF2RB code la chaîne bêta commune (βc), partagée par les récepteurs humains de l’IL‑3, de l’IL‑5 et du GM‑CSF, et participe à la formation de complexes de signalisation à haute affinité qui régulent la prolifération, la survie et la différenciation des progéniteurs hématopoïétiques. Lors de la liaison des cytokines, la signalisation dépendante de βc active les voies JAK2/STAT5, PI3K–AKT et RAS–MAPK, coordonnant l’engagement des lignées myéloïdes et les fonctions effectrices inflammatoires. L’activité de CSF2RB module les réponses des granulocytes et des macrophages et influence les transitions d’état cellulaire induites par les cytokines dans les systèmes immunitaire et hématologique. Une signalisation βc dérégulée a été associée à une activation myéloïde aberrante et à des programmes inflammatoires, faisant de CSF2RB un nœud clé pour les études mécanistiques de la signalisation des récepteurs aux cytokines.
IL-3/IL-5/GM-CSFRβ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CSF2RB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CSF2RB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CSF2RB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CSF2RB.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.