IL-28A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405375

概要

IFNL2は、III型インターフェロンであるインターフェロンλ2（IL-28A）をコードしており、IFNLR1/IL10RB受容体複合体を介してシグナルを伝達し、JAK–STAT経路を活性化してインターフェロン刺激遺伝子（ISG）を誘導します。このサイトカインは、上皮および粘膜における抗ウイルス防御を支えるとともに、ケモカイン産生や抗原提示のあり方を調節することで、自然免疫および獲得免疫応答を制御します。IL-28Aの活性は、TLRやRIG-I様受容体経路などのパターン認識受容体（PRR）シグナルとも交差し、抗ウイルス性の転写プログラムを協調的に制御します。IFNL2シグナルの破綻や遺伝的多様性は、ウイルス感染や炎症過程における転帰の違いと関連することが報告されており、宿主—病原体相互作用や免疫制御の機序研究において有用な標的となります。

IL-28A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIFNL2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IFNL2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IFNL2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-28Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-28Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IFNL2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-28Aの機能に不可欠なIFNL2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IFNL2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-28A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIL-28A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IFNL2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-28A HDRプラスミド（h）および IL-28A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIFNL2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIFNL2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。