IL-27Rα Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424540

Descripción general

Il27ra codifica la cadena alfa del receptor de interleucina 27 en ratón (IL-27Rα, también conocida como WSX-1), una subunidad receptora de citocinas que se asocia con gp130 para formar un complejo receptor funcional de IL-27. La señalización a través de IL-27Rα activa las vías JAK/STAT, en particular STAT1 y STAT3, para orientar la diferenciación de linfocitos T, modular programas inflamatorios asociados a Th1 y Th17 e influir en la producción de citocinas en múltiples tipos de células inmunitarias. Mediante estos procesos, IL-27Rα contribuye a la regulación de la homeostasis inmunitaria, las respuestas impulsadas por antígenos y el control por retroalimentación de la inflamación. La desregulación de la señalización IL-27/IL-27Rα se ha implicado en modelos de patología autoinmunitaria, inflamación crónica y disfunción inmunitaria inducida por infecciones, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en la investigación inmunológica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-27Rα (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Il27ra en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Il27ra junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Il27ra tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-27Rα.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Il27ra para la investigación de la señalización de IL-27Rα, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Il27ra críticos para la función de IL-27Rα
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Il27ra para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IL-27Rα CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IL-27Rα CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Il27ra. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-27Rα (m) y el plásmido HDR IL-27Rα (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Il27ra para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Il27ra definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.