IL-27Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405846

概要

IL27RA は、IL-27 受容体α（IL-27Rα、WSX-1/TCCR とも呼ばれる）をコードしており、gp130 とシグナル伝達複合体を形成して IL-27 に対する応答を媒介するサイトカイン受容体サブユニットです。IL-27Rα が IL-27 と結合すると JAK/STAT 経路（とりわけ STAT1 および STAT3）が活性化され、T 細胞分化の制御、過剰な炎症の抑制、抗原提示細胞機能の調節に関与します。IL27RA 依存的なシグナル伝達は Th1/Th17 のバランス、制御性ネットワーク、自然免疫と獲得免疫のクロストークと交差するインターフェロン応答性遺伝子プログラムに影響を与えます。この経路の破綻は免疫介在性病態や宿主防御の変化と関連づけられており、IL27RA は炎症性疾患および感染症モデルにおける機序解明研究の有用な標的となります。

IL-27Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるIL27RA遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、IL27RA内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、IL27RAのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-27Rαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-27Rαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、IL27RA欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-27Rαの機能に不可欠なIL27RAエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、IL27RAゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-27Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIL-27Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、IL27RA遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-27Rα HDRプラスミド（h）および IL-27Rα HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIL27RAホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIL27RA標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。