IL-23 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-429901

概要

Il23a はインターロイキン-23（IL-23）の p19 サブユニットをコードしている。IL-23 はヘテロ二量体のサイトカインで、IL-12p40 と組み合わさって IL-23 を形成し、IL-23 受容体複合体を介してシグナル伝達を行い、JAK/STAT 経路、とりわけ STAT3 を活性化する。樹状細胞やマクロファージなどの骨髄系細胞において、IL-23 はパターン認識受容体からの入力を統合し、炎症プログラムを強化して 17 型免疫を促進する。IL-23 は Th17 細胞およびその他の IL-17 産生集団の増殖と維持を支え、自然免疫による感知を IL-17A/F や IL-22 のエフェクター応答へと結び付ける。Il23a/IL-23 活性の破綻は、腸管炎症、乾癬様皮膚炎、中枢神経系の自己免疫などを含む自己免疫・炎症性病態のマウスモデルにおいて、機序的な中核軸として広く用いられている。

IL-23 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl23a遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il23a内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il23aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-23タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-23シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il23a欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-23の機能に不可欠なIl23aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il23aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-23 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-23 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il23a遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-23 HDRプラスミド（m）および IL-23 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl23aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl23a標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。